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Shanghai Fengxian South Bridge
Product Categories
Shanghai Hewu Biotechnology Co., Ltd
pU6-Ets2(mouse)-sgRNA3-Cas9-EGFP
NegotiableUpdate on 05/06
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Overview
名称pU6-Ets2(mouse)-sgRNA3-Cas9-EGFP$r$n别称CGACTCTCCAGAGAACGGTG$r$n质粒宿主哺乳细胞$r$n质粒用途基因编辑
Product Details
| 名称 | pU6-Ets2(mouse)-sgRNA3-Cas9-EGFP |
| 别称 | CGACTCTCCAGAGAACGGTG |
| 质粒宿主 | 哺乳细胞 |
| 质粒用途 | 基因编辑 |
| 片段类型 | CRISPR |
| 片段物种 | 小鼠 |
| 原核抗性 | Amp |
| 荧光标记 | 绿色 |
| 启动子 | U6 |
| 复制子 | pUC |
| 感受态 | Stbl3 |
| 温度 | 37度 |
| 背景载体 | pX458 |
| 正向引物 | U6-F |
注意事项：转化前请准确查找该质粒相应的抗生素名称、抗生素使用浓度、感受态名称和培养温度。
1、收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl~50μl无菌水或 pH8.0 的 1*TE缓冲液来溶解质粒，室温放置1min；
2、从-80℃冰箱中取出相应的感受态，置于冰盒上解冻，并做好标记；
3、取2μl质粒加至100μl感受态中，冰浴30min；
4、42℃热激90s，再冰浴2min；
5、加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡培养45min；
6、6000rpm离心5min，仅留100ul上清混匀菌体沉淀；
7、混匀后的菌液加至对应抗性的LB平板上，倒入适量玻璃珠，涂匀液体；
8、将平板正向培养1h，再倒置培养12h~16h；
9、挑取单克隆菌落至对应抗性的LB液体培养基中，震荡培养12h~16h，根据实验需要提取质粒