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Shanghai Fengxian South Bridge
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Shanghai Hewu Biotechnology Co., Ltd
pCMV-3×FLAG-EEF1D(pig)-Myc-Neo
NegotiableUpdate on 05/06
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- Place of Origin
Overview
名称pCMV-3#215;FLAG-EEF1D(pig)-Myc-Neo$r$n别称XM_021090459.1;$r$n质粒宿主哺乳细胞$r$n质粒用途蛋白表达
Product Details
| 名称 | pCMV-3×FLAG-EEF1D(pig)-Myc-Neo |
| 别称 | XM_021090459.1; |
| 基因长 | 840bp |
| 质粒宿主 | 哺乳细胞 |
| 质粒用途 | 蛋白表达 |
| 片段类型 | ORF |
| 片段物种 | 猪 |
| 原核抗性 | Amp |
| 筛选标记 | Neo/G418 |
| 启动子 | CMV |
| 复制子 | pUC |
| 感受态 | DH5a |
| 温度 | 37度 |
| 背景载体 | pCMV-T7-3×FLAG-MCS-Neo |
| 正向引物 | CMV-F |
注意事项：转化前请准确查找该质粒相应的抗生素名称、抗生素使用浓度、感受态名称和培养温度。
1、收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl~50μl无菌水或 pH8.0 的 1*TE缓冲液来溶解质粒，室温放置1min；
2、从-80℃冰箱中取出相应的感受态，置于冰盒上解冻，并做好标记；
3、取2μl质粒加至100μl感受态中，冰浴30min；
4、42℃热激90s，再冰浴2min；
5、加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡培养45min；
6、6000rpm离心5min，仅留100ul上清混匀菌体沉淀；
7、混匀后的菌液加至对应抗性的LB平板上，倒入适量玻璃珠，涂匀液体；
8、将平板正向培养1h，再倒置培养12h~16h；
9、挑取单克隆菌落至对应抗性的LB液体培养基中，震荡培养12h~16h，根据实验需要提取质粒